Описание:
Тест-система предназначена для обнаружения и дифференциации вируса гриппа А подтипа Н5N1 методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) в образцах сывороток крови, органах больных птиц и животных, в инфицированных культурах клеток.
Анализ по выявлению и дифференциации вируса гриппа А подтипа Н5N1 включает выделение суммарной РНК, проведение реакции обратной транскрипции и амплификации специфических фрагментов в полимеразной цепной реакции (ОТ-ПЦР) c двумя парами специфических праймеров и электрофорез в агарозном геле.
Тест-система состоит из следующих наборов:
- набор для выделения РНК (набор 1);
- набор для выявления и дифференциации РНК вируса гриппа А подтипа Н5N1 методом ПЦР (набор 2);
- набор для проведения электрофореза (набор 3).
Тест-система рассчитана на проведение 50 анализов с двумя парами праймеров.
Время проведения анализа:
От 8 до 16 часов (в зависимости от количества проб и используемого оборудования).
Принцип действия:
В основе ПЦР лежит многократное повторение циклов денатурации исследуемой ДНК при температуре 95°С, гибридизации ДНК со специфическими праймерами при температуре 57°С и репликации с них комплементарных цепей ДНК с помощью термостабильной ДНК-полимеразы при температуре 72°С. В результате амплификации концентрация синтезированного фрагмента в исследуемой пробе увеличивается в миллионы раз, что позволяет визуально учитывать результаты анализа с помощью электрофореза в агарозном геле. Вирус гриппа А отличается высокой степенью вариабельности, особенно это касается поверхностных гликопротеинов вириона: гемагглютинина (Н) и нейраминидазы (N). Известно 16 антигенных подтипов гемагглютинина (Н1-Н16) и 9 подтипов нейраминидазы (N1-N9). Наиболее эпидемически опасным считается вирус гриппа подтипа H5N1.
Тест-система разработана таким образом, что во время проведения ПЦР специфически амплифицируются фрагменты генов H и N только вирусов подтипа H5N1. При этом получаются ПЦР фрагменты разной длины, что дополнительно облегчает дифференциацию.
Хранение:
Набор 2 хранят при температуре от −18 до −20°С, наборы 1 и 3 – от 2 до 6°С.
Срок годности:
12 месяцев.